高血糖對腦出血大鼠細胞凋亡及Bax、Bcl-2表達的影響.pdf

1、背景和目的
　　 腦出血(ICH)是一種威脅人類健康的急性疾病。許多研究認為:細胞凋亡參與了神經(jīng)元的繼發(fā)性損傷,細胞凋亡是腦出血后神經(jīng)元損傷的重要因素之一。與非糖尿病患者相比,患糖尿病的腦出血患者在住院期間病情以及預后的狀況都相對較差。高血糖可能會促進神經(jīng)元的凋亡并且已經(jīng)在缺血性腦血管病中得到證實,而目前這方面在腦出血中的研究相對較少。
　　 本實驗通過建立高血糖大鼠腦出血動物模型,利用免疫組織化學和TUNEL方法,觀察

2、血腫周圍腦組織Bax、Bcl-2的表達和神經(jīng)細胞的凋亡；探討高血糖對血腫周圍腦組織Bax、Bcl-2表達和神經(jīng)細胞凋亡的影響,為腦出血的臨床治療提供理論依據(jù)。
　　 材料與方法
　　 健康成年雄性SD大鼠96只,隨機分為4組:假手術(shù)組、正常血糖組、高血糖組以及胰島素干預組。每組設(shè)4個時間點:6h、24h、72h、7d。
　　 通過腹腔注射鏈脲菌素(STZ)制作高血糖動物模型,血糖值大>11.1mmol/L,認為該

3、模型制作成功。
　　 在立體定向儀下于右側(cè)尾狀核區(qū)注入未凝自體動脈血建立腦出血動物模型。
　　 組織切片的制備:成功模型在相應時間點灌注、取材,以注射針道為中心做冠狀切片。
　　 指標檢測:Bax、Bcl-2的檢測是采用免疫組織化學染色。應用圖像分析系統(tǒng)測其免疫染色陽性區(qū)平均積分光密度,取其平均值；神經(jīng)細胞凋亡采用TUNEL法染色。凋亡指數(shù)(AI)=凋亡神經(jīng)元/總神經(jīng)元×100％。
　　 統(tǒng)計學方法:所有

4、數(shù)據(jù)均用均數(shù)±標準差((x)±s)表示,采用SPSS13.0軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析,多組均數(shù)間的比較采用單因素方差分析,均數(shù)間的兩兩比較采用LSD檢驗,Bax與TUNEL的相關(guān)性采用直線相關(guān)分析,檢驗水準a=0.05。
　　 結(jié)果：
　　 1 Bax和Bcl-2表達的動態(tài)變化
　　 在假手術(shù)組紋狀體Bax和Bcl-2有少量表達,從6h至7d變化相對較小。在正常血糖組、高血糖組以及胰島素干預組血腫周圍腦組織不同時間

5、點均有Bax和Bcl-2的表達,且從6h逐漸增高,24h達峰,7d仍有表達。高血糖組大鼠腦血腫周圍組織Bax和Bcl-2的表達在相應時間點明顯高于其它組(P<0.05),胰島素干預組上述指標在相應時間點均低于高血糖組(P<0.05),而高于假手術(shù)組,與腦出血組無明顯差別(P>0.05)。
　　 2神經(jīng)細胞凋亡的動態(tài)變化
　　 在假手術(shù)組紋狀體僅見少量的凋亡細胞,從6h至7d變化相對較小。在正常血糖組、高血糖組以及胰島素干

6、預組血腫周圍腦組織不同時間點均有凋亡細胞的表達,且從6h逐漸增高,24h達峰,7d仍有持續(xù)存在。高血糖組大鼠腦血腫周圍組織凋亡細胞在相應時間點明顯明顯高于其它組(P<0.05),胰島素干預組上述指標在相應時間點均低于高血糖組(P<0.05),而高于假手術(shù)組,與腦出血組無明顯差別(P>0.05)。
　　 3血腫周圍細胞凋亡與Bax表達的相關(guān)性結(jié)果
　　 高血糖組同一時間點的凋亡指數(shù)與Bax表達呈正相關(guān)性(r=0.80,P<