胃癌相關(guān)成纖維細(xì)胞影響胃癌細(xì)胞對(duì)順鉑敏感性的初步研究.pdf

1、胃癌是我國死亡率最高的惡性腫瘤之一，男女人口死亡率遠(yuǎn)高于歐美發(fā)達(dá)國家?；熓侵委熅植客砥诤娃D(zhuǎn)移性胃癌的主要方法。然而迄今為止，以5-FU、順鉑和紫杉醇為基礎(chǔ)的各種聯(lián)合化療方案的總體有效率只有20-40％，大部分病人遲早會(huì)經(jīng)歷化療失敗。原發(fā)或繼發(fā)性耐藥是導(dǎo)致胃癌化療失敗的主要原因之一。
　　從以往的研究中我們發(fā)現(xiàn)，體外實(shí)驗(yàn)大部分化療藥物可以輕易地誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞系的凋亡，然而一旦移至體內(nèi)，藥物療效即“大打折扣”。這一現(xiàn)象提示我們，除了腫

2、瘤細(xì)胞自身的耐藥本能以外，機(jī)體內(nèi)復(fù)雜的環(huán)境，特別是腫瘤微環(huán)境可能參與了腫瘤的耐藥過程。而作為腫瘤微環(huán)境中一個(gè)不可缺少的組成元素，腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞（cancer associated fibroblasts，CAFs）與腫瘤的相互作用正在不斷引起人們的注意。在前期實(shí)驗(yàn)中，本課題組將成纖維細(xì)胞與胃癌細(xì)胞共培養(yǎng)后，發(fā)現(xiàn)順鉑對(duì)胃癌細(xì)胞的殺傷作用明顯減弱，且當(dāng)成纖維細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞達(dá)到最適比例(1∶1)搭配時(shí)，對(duì)胃癌細(xì)胞的保護(hù)最佳。為了更準(zhǔn)確的驗(yàn)

3、證這一現(xiàn)象，我們首先通過術(shù)中獲取的胃癌患者新鮮組織（瘤內(nèi)組織或正常組織），原代培養(yǎng)了數(shù)個(gè)不同患者來源的成纖維細(xì)胞系。通過免疫細(xì)胞化學(xué)方法，我們對(duì)所建成纖維細(xì)胞系的特定蛋白（α-SMA、FAP、Vimentin)的表達(dá)情況做了鑒定，以區(qū)別胃癌相關(guān)成纖維細(xì)胞和正常成纖維細(xì)胞。隨后，我們通過成纖維細(xì)胞-腫瘤細(xì)胞相互作用模型（Transwell共培養(yǎng)、條件培養(yǎng)基培養(yǎng)），研究了成纖維細(xì)胞對(duì)胃癌細(xì)胞的生長、運(yùn)動(dòng)和耐藥的影響。實(shí)驗(yàn)證明胃癌相關(guān)細(xì)胞能促

4、進(jìn)胃癌細(xì)胞的生長和運(yùn)動(dòng)，并能降低順鉑對(duì)胃癌細(xì)胞的敏感性。
　　已有研究發(fā)現(xiàn)TGF-β/Smad信號(hào)通路是腫瘤-間質(zhì)相互作用中重要的通路之一。腫瘤細(xì)胞和成纖維細(xì)胞能夠通過旁分泌TGF-β等細(xì)胞因子進(jìn)行相互作用，最終影響腫瘤的增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移。本課題組所觀察到的胃癌相關(guān)成纖維細(xì)胞促進(jìn)胃癌細(xì)胞生長、運(yùn)動(dòng)和耐藥的現(xiàn)象是否也有TGF-β/Smad通路的參與？有無其他通路參與介導(dǎo)了這一現(xiàn)象的產(chǎn)生？為了闡述相關(guān)機(jī)制，我們Western-blot

5、、PCR等技術(shù)，研究了TGF-β及Smad2在共培養(yǎng)模型中的表達(dá)情況。結(jié)果表明，TGF-β/Smad2通路參與了胃癌相關(guān)成纖維細(xì)胞促進(jìn)胃癌細(xì)胞生長、運(yùn)動(dòng)和對(duì)順鉑耐藥的機(jī)制，但TGF-β/Smad2在相應(yīng)機(jī)制中的具體作用仍需要進(jìn)一步研究。
　　通過上述實(shí)驗(yàn)，我們得出以下結(jié)論:
　　1)胃癌相關(guān)成纖維細(xì)胞具有區(qū)別于正常成纖維細(xì)胞的表型，且其生長特性在不同個(gè)體及不同組織中具有異質(zhì)性;
　　2)胃癌相關(guān)成纖維細(xì)胞能促進(jìn)胃癌細(xì)胞