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文檔簡介
1、雞傳染性法氏囊?。↖nfectious Bursal Disease,IBD)是由傳染性法氏囊病病毒(Infectious Bursal Disease Virus,IBDV)引起的主要危害雛雞的一種急性、高度接觸性、致死性傳染病。IBDV主要侵害雛雞的中樞免疫器官-法氏囊,感染后病毒粒子的大量復制導致B淋巴細胞的裂解和缺失,耐過雞往往產生嚴重免疫抑制,進而引起疫苗免疫失敗、增加對其它病原的易感性,嚴重危害養(yǎng)禽業(yè)的健康發(fā)展。
2、IBDV是雙RNA病毒科、禽雙RNA病毒屬的典型代表,其基因組由A、B兩個節(jié)段組成,A節(jié)段全長約為3200bp,B節(jié)段全長約為2800bp,共編碼5種蛋白。其中VP2是IBDV主要的結構蛋白,是病毒衣殼的唯一組分,其分子表面攜帶有病毒的主要宿主保護性抗原,決定IBDV的細胞嗜性和毒力。病毒侵染宿主的第一步,是通過與細胞受體的互作而結合易感細胞。雖然已有幾個蛋白被鑒定可影響IBDV的侵染,然而IBDV的細胞受體及其具體效應機制至今仍未被明
3、確。
本研究首先提取雞的B淋巴細胞膜蛋白,利用IBDV衣殼蛋白VP2的單克隆抗體通過免疫沉淀技術篩選互作蛋白。質譜分析結果提示,宿主蛋白TvbS3與IBDV可能存在相互作用;并且熒光定量RT-PCR結果顯示,IBDV感染易感細胞DF1和SPF雞后,細胞內TvbS3的轉錄水平均上調,提示TvbS3可能在IBDV感染過程中發(fā)揮重要作用。
TvbS3是禽白血病病毒B亞群(ALV-B)和D亞群(ALV-D)的受體蛋白,屬于腫
4、瘤壞死因子受體(TNFR)超家族,是Ⅰ型跨膜蛋白,其胞內區(qū)含有死亡結構域,通過與其配體或抗體結合后而被激活,能引起細胞凋亡。為了進一步驗證TvbS3在IBDV侵染易感細胞過程中的作用,本研究克隆了雞源TvbS3基因,并系統地從病毒蛋白表達和病毒滴度水平,研究了宿主蛋白TvbS3對IBDV復制的影響。結果顯示,TvbS3上調表達促進IBDV復制,TvbS3被小分子干擾RNA(siRNA)敲低則抑制IBDV復制,這說明TvbS3是IBDV侵
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