南京地區(qū)漢族人群A血型亞型的分子機制調查與分析.pdf

1、目的：
　　血型是人類血液的主要特征之一，表達了產生抗原-抗體系統(tǒng)的遺傳特征。與臨床相關的主要是ABO、Rh、Kell、Kidd、MNSs等十余個血型系統(tǒng)，其中以ABO、Rh血型系統(tǒng)最為重要。ABO血型與部分疾病的發(fā)生具有關聯(lián)性，不僅與輸血有密切的關系，也與器官移植、溶血性疾病、法醫(yī)鑒定和人類學有關。
　　ABO血型系統(tǒng)有A、B、H抗原，出現(xiàn)的表型有A、B、O、AB血型，該系統(tǒng)最常見亞型出現(xiàn)在含A抗原的人群中，B亞型不多見。

2、A型個體大多數(shù)屬于A1型，少數(shù)屬于A2型，及更少頻率的A3、Ax及Am等亞型。在這些稀少的A亞型中不僅具有很強的抗B抗體，還會產生抗原性不同的抗A抗體，這就給臨床血型的鑒定和配血帶來困難，從而影響臨床輸血的安全。
　　目前國內對A亞型的概率分布報道的不多，且南京地區(qū)未見關于該方面的報道。本研究擬通過較大樣本量對南京地區(qū)漢族人群A血型亞型的基因分析，獲取本地區(qū)人群A血型基因多態(tài)性的分布資料，為中國漢族人群A血型亞型多樣性提供數(shù)據，豐

3、富人類血型學內容，為進化、遷徙的研究提供依據;為血清學檢測存在疑問的標本提供其基因分子的佐證;根據亞型調查的結果，考慮建立ABO亞型資料庫的可行性，確保臨床輸血安全。
　　方法：
　　隨機選擇2013年10月-2014年6月來江蘇省血液中心符合《獻血者健康檢查要求》的無償獻血者ABO血型定型為A型和AB型的EDTA.K2抗凝全血標本，其中A型標本7839人份、AB型標本2173人份，共計10012人份。采用微板法進行A亞型的

4、血清學篩查。收集弱凝集和不凝集標本的白細胞膜層，置-20℃冰箱低溫保存。采用原平皓（天津）生物技術有限公司商用試劑盒按照說明書提取樣本基因組DNA，對ABO血型基因的第6-7外顯子進行測序，采用SeqScapeV2.5軟件進行數(shù)據分析，將A101序列作為標準序列，測定序列與標準序列比對后，獲取ABO基因6-7外顯子多態(tài)性，將多態(tài)性情況與ABO血型突變數(shù)據庫序列比較，從而確定ABO血型序列及基因型。
　　結果：
　　1、南京地

5、區(qū)A血型亞型在A型人群中的比例約為0.31％，其基因以A201亞型為主，而在AB型人群中的比例約為1.80％，其基因型以A205亞型為主;
　　2、在2169名AB型人群中檢出1例CisAB06和1例B(A)02，各占AB型的0.046％(1/2169)，據此推算出CisAB亞型和B(A)在南京地區(qū)漢族人群的比例分別為4.6/10萬(0.0046％)，合計為9.2/10萬(0.0092％)，明顯高于原先血清學報道的1/17-58萬

6、的比例;
　　3、發(fā)現(xiàn)1例A205/001基因型出現(xiàn)nt806位雜合新突變的樣本，經克隆測序證實突變位于0單倍型基因上，該新等位基因第7外顯子序列已經提交Genbank，序列號為KP341759;
　　4、A亞型在A型人群中血清學表型結果與分子生物學結果無顯著差異，而在AB型人群中血清學表型結果與分子生物學結果有顯著差異（p＜0.05)。判斷A2亞型，必須將血清學試驗與分子生物學技術相結合。
　　結論：
　　本研