姜黃素對高氧誘導(dǎo)AECII損傷的保護(hù)作用.pdf

1、目的：通過觀察姜黃素對高氧暴露下早產(chǎn)鼠AECⅡ細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激水平、核因子E2相關(guān)因子2(Nrf2)核轉(zhuǎn)位及其相關(guān)抗氧化酶基因表達(dá)的影響,探討姜黃素對高氧誘導(dǎo)AECⅡ細(xì)胞損傷的保護(hù)作用及可能機制。
　　方法：原代培養(yǎng)的早產(chǎn)鼠AECⅡ,隨機分為3組:空氣組、高氧組、姜黃素干預(yù)組。姜黃素干預(yù)組給予10umol/L姜黃素處理后與高氧組分別通入95％O2/5%CO2高純混合氣(5L/min),10min后密封。各組均置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24

2、小時(37℃5%CO2)。收集各組細(xì)胞,倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長及形態(tài)學(xué)變化;CCK-8法評估各組細(xì)胞活性;流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞內(nèi)活性氧(reactiveoxygenspecies,ROS)水平;免疫熒光技術(shù)觀察Nrf2核轉(zhuǎn)位情況;實時熒光定量PCR法檢測血紅素氧合酶一1(HO一1)、谷胱甘肽過氧化物酶2(GPX2)mRNA的表達(dá)水平。
　　結(jié)果：1、與空氣組比較,高氧組AECⅡ生長狀態(tài)明顯不良,表現(xiàn)為:懸浮細(xì)胞增多,細(xì)胞稀疏、散在

3、分布,核濃縮;與高氧組比較,姜黃素干預(yù)組能明顯改善AECⅡ的不良生長狀態(tài),表現(xiàn)為:細(xì)胞貼壁較好,懸浮細(xì)胞減少,細(xì)胞排列較緊密,核濃縮減少。2、與空氣組比較,高氧暴露后AECⅡ細(xì)胞活性下降,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);與高氧組比較,姜黃素干預(yù)后AECⅡ細(xì)胞活性升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。3、與空氣組比較,高氧組AECⅡ細(xì)胞內(nèi)ROS水平升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);與高氧組比較,姜黃素干預(yù)后AECⅡ細(xì)胞內(nèi)ROS水

4、平降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。4、與空氣組比較,高氧暴露能誘導(dǎo)Nrf2由胞漿轉(zhuǎn)入胞核,核內(nèi)表達(dá)增加;與高氧組比較,姜黃素干預(yù)后能促進(jìn)Nrf2由胞漿轉(zhuǎn)入胞核,核內(nèi)表達(dá)明顯增多。5、與空氣組比較,高氧組HO一1、GPX2mRNA表達(dá)水平升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);與高氧組比較,姜黃素干預(yù)組HO一1、GPX2mRNA表達(dá)水平升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
　　結(jié)論：姜黃素對高氧暴露AECⅡ細(xì)胞損傷具有保