促紅細(xì)胞生成素及其受體在卵巢癌細(xì)胞的表達(dá)和相關(guān)作用的研究.pdf

1、目的：探討促紅細(xì)胞生成素受體在卵巢癌細(xì)胞上的表達(dá)及重組人促紅細(xì)胞生成素(recombinanthumanerythropoietin，rhEPO)對(duì)卵巢癌HO-8910細(xì)胞增殖的影響，為臨床應(yīng)用rhEPO治療卵巢癌繼發(fā)貧血提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)，為rhEPO能否替代輸血安全應(yīng)用于卵巢癌貧血的治療提供新的理論依據(jù)。 方法：卵巢癌HO-8910細(xì)胞在復(fù)蘇后用含10％胎牛血清RMPI-1640培養(yǎng)基在37℃，5％CO2環(huán)境下常規(guī)培養(yǎng)。穩(wěn)定

2、傳代2d后備用，取6瓶HO-8910細(xì)胞，加入含有濃度分別為50U/mL、100U/mL、200U/mL的rhEPO的培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，作為實(shí)驗(yàn)組；同時(shí)以2瓶沒(méi)有加rhEPO的卵巢癌HO-8910細(xì)胞為對(duì)照組。分別培養(yǎng)48h和72h后，用離心沉淀法收集各培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞：①用RT-PCR法檢測(cè)人卵巢癌細(xì)胞株H08910EPORmRNA的表達(dá)，β-肌動(dòng)蛋白作為內(nèi)對(duì)照，32個(gè)循環(huán)后以1％瓊脂糖凝膠電泳，凝膠成像分析系統(tǒng)進(jìn)行凝膠掃描及分析，以EP

3、ORmRNA擴(kuò)增帶與β-肌動(dòng)蛋白擴(kuò)增帶的灰度比值作為EPORmRNA表達(dá)相對(duì)值。②用流式細(xì)胞儀檢測(cè)r-HuEPO對(duì)卵巢癌細(xì)胞凋亡及增值影響。 結(jié)果：顯著差異(均為P<0.01)。實(shí)驗(yàn)組卵巢癌細(xì)胞EPOR表達(dá)水平與對(duì)照組血相比有所降低，各實(shí)驗(yàn)組間比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組之間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)。1.實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：經(jīng)不同濃度的rhEPO處理組在48h、72h這兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)，與對(duì)照組相比時(shí)，P均<0.01，且經(jīng)不同濃

4、度的rhEPO處理組的EPORmRNA表達(dá)的相對(duì)值均較對(duì)照組有所減少，但不同濃度處理組之間EPORmRNA表達(dá)的相對(duì)值沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。對(duì)于同一濃度的EPO處理組在不同時(shí)間點(diǎn)相比，P均>0.05。2.實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：經(jīng)不同濃度的EPO處理組在48h、72h這兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)，與對(duì)照組相比時(shí)，P均<0.01，且經(jīng)不同濃度的EPO處理組的S期細(xì)胞百分率較對(duì)照組有所減少，但不同濃度處理組之間S期細(xì)胞百分率沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。對(duì)于同一濃度的EPO處理組在不同