枸杞多糖對糖尿病大鼠視網(wǎng)膜保護作用的研究.pdf

1、目的：觀察枸杞多糖(lyceumbarbarumpolysaccharides,LBP)對鏈脲佐菌素(streptozotocin,STZ)誘導的糖尿病大鼠視網(wǎng)膜病理改變以及對視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮生長因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)及閉鎖蛋白(Occludin)表達的影響,探討枸杞多糖對糖尿病大鼠視網(wǎng)膜的保護作用及其機理。
　　方法：選擇健康成年雄性SD大鼠55只,隨機分為正常對照組(CO

2、N組)15只和糖尿病組(DM組)40只。糖尿病組大鼠給予腹腔注射STZ制備糖尿病模型,其中1只大鼠未成模,其余39只成模大鼠再隨機分為LBP治療組(LBP組)18只和DM生理鹽水對照組(Nacl組)21只。LBP組大鼠予以枸杞多糖(160mg/kg/d)每日定時定量灌胃,Nacl組大鼠同樣每日定時等量生理鹽水灌胃,直至處死前一天。三組大鼠自給藥后繼續(xù)分別飼養(yǎng)至4周、12周、20周時給予測血糖后處死。觀察各組大鼠的一般情況,記錄不同時期各

3、組大鼠的血糖值。采用HE染色光鏡觀察糖尿病大鼠視網(wǎng)膜的病理改變,采用免疫組織化學染色檢測各組大鼠視網(wǎng)膜VEGF及Occludin的表達情況。
　　結(jié)果：1、成功的建立糖尿病大鼠模型。測各組大鼠血糖,CON組大鼠血糖濃度始終低于6.00mmol/L;在糖尿病大鼠給藥后第4周、第12周、第20周,Nacl組血糖濃度持續(xù)增高,分別為27.1±4.23mmol/L、28.2±5.41mmol/、29.1±6.27mmol/L;而LBP組在

4、同時間點血糖濃度均明顯低于Nacl組(p<0.01),4周、12周、20周血糖濃度分別為11.8±4.13mmol/L、14.6±3.89mmol/L、15.8±3.99mmol/L。
　　2、糖尿病大鼠視網(wǎng)膜組織學HE染色檢查顯示,在糖尿病大鼠給藥后第4周、第12周、第20周時,CON組大鼠視網(wǎng)膜始終未見明顯異常變化。第4周時,Nacl組已出現(xiàn)病理損害,LBP組大鼠視網(wǎng)膜未見明顯異常變化。第12周時,Nacl組和LBP組大鼠均出

5、現(xiàn)視網(wǎng)膜病理損害,Nacl組大鼠病變較LBP組重,并且隨病程增加逐漸加重,20周時其視網(wǎng)膜各層細胞排列雜亂無章,數(shù)量顯著減少,毛細血管明顯擴張。而LBP組在相同時間點與Nacl組相比,其視網(wǎng)膜厚度較厚,各層細胞排列較整齊,細胞數(shù)量較多,毛細血管輕度擴張,其視網(wǎng)膜病理損傷明顯較Nacl組輕。
　　3、視網(wǎng)膜免疫組織化學染色觀察:1)VEGF在視網(wǎng)膜的表達:在糖尿病大鼠給藥后第4周、第12周、第20周三個時間點,CON組大鼠視網(wǎng)膜的V

6、EGF表達量始終未有明顯變化。Nacl組在第4周時其表達量與CON組比較就有統(tǒng)計學差異(p<0.05),并隨著病程的發(fā)展,大鼠視網(wǎng)膜VEGF表達量不斷增高,12周、20周時其表達量與CON組比較均有統(tǒng)計學意義(p<0.01)。LBP組大鼠在第4周時其視網(wǎng)膜的VEGF表達量與CON組比較無統(tǒng)計學差異
　　(p>0.05),12w時VEGF表達量有所增加,與CON組比較有統(tǒng)計學意義(p<0.05),并隨著病程的進展其表達量亦有增加,但

7、明顯低于同期Nacl組的表達量(p<0.01)。
　　2)Occludin在視網(wǎng)膜的表達:在糖尿病大鼠給藥后第4周、第12周、第20周時,CON組大鼠視網(wǎng)膜的Occludin陽性表達呈黃褐色,表達量始終未有明顯變化。Nacl組在第4周時其表達量與CON組比較無統(tǒng)計學差異(p>0.05),隨著病程的發(fā)展,Occludin表達量不斷減少,12周、20周時其表達量與CON組比較均有統(tǒng)計學意義(p<0.01)。而LBP組大鼠在第4周、第1

8、2周時其視網(wǎng)膜的ccludin表達量與CON組比較均無統(tǒng)計學差異
　　(p>0.05),20w時Occludin表達量才有所減少,與CON組比較有統(tǒng)計學意義(p<0.05),但其表達量仍高于Nacl組,有統(tǒng)計學意義(p<0.05)。
　　結(jié)論：LBP可顯著降低糖尿病大鼠血糖濃度,能夠有效的改善視網(wǎng)膜各層組織病理損傷,抑制視網(wǎng)膜VEGF表達量的增多,阻止視網(wǎng)膜新生血管的形成,并上調(diào)Occludin表達量,穩(wěn)定視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮的