Survivin突變基因對肺癌細胞的凋亡作用.pdf

1、目的 研究Survivin Thr<'34>→Ala突變基因對肺癌A549細胞株的凋亡作用;研究Survivin Thr<'34>→Ala突變基因對肺癌95C和95D細胞株的凋亡作用,為肺癌的基因治療開拓新的道路.方法 從肺癌A549細胞株中,用RT-PCR提取Survivin基因,構建質粒,并對其進行定點突變,構建Survivin Thr<'34>→Ala突變基因,轉染A549細胞株,培養(yǎng)24、48、72、96小時Hoechst凋亡染

2、色,熒光顯微鏡觀察測凋亡率;構建C-末端長α螺旋區(qū)突變的Survivin Mutant-alpha和BIR區(qū)突變的Survivin Mutant-BIR-1、Survivin Mutant-BIR-2突變基因,轉染A549細胞株,Hoechst染色測凋亡率;肺癌95C、95D細胞株分別行Survivin免疫組化染色,并用Survivin Thr<'34>→Ala突變基因轉染95C和95D細胞,48小時后Hoechst染色.結論 Surv