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文檔簡介
1、目的:觀察生姜醇提取物(Extract of Zingiber Ethanol,EZE)對人前列腺癌PC-3細胞體外增殖、侵襲的影響并探討其可能,機制。
方法:分別用濃度為0ug/ml(對照組)、10ug/ml、20ug/ml、40ug/ml EZE作用PC-3細胞。①MTT法檢測各組分別作用24h、48h、72h后PC-3細胞抑制率;②DNA Ladder法檢測各組作用72h后PC-3細胞核酸片段在凝膠電泳上條帶形成情況;③
2、Transwell小室實驗觀察各組作用72h后 PC-3細胞穿透濾膜情況;④RT-PCR、Western blott法檢測各組作用72h后PC-3細胞內(nèi)bax、P53、bcl-2 mRNA和蛋白表達情況。
結(jié)果:(1)MTT結(jié)果示:各實驗組EZE對PC-3細胞作用24h后細胞抑制率分別為0、4.31%、18.39%、33.6%;作用48h后分別為0、8.89%、25.72%、43.75%;作用72h后分別為0、17.12%、3
3、8.70%、57.96%。實驗組與對照組比較差異均有顯著性(p<0.05);
(2) DNA Ladder實驗示:經(jīng)20ug/ml、40ug/mlEZE作用72h后的PC-3細胞的在凝膠電泳圖上呈現(xiàn)典型的梯狀條帶,10ug/mlEZE組不明顯;
(3) Transwell小室實驗示:各實驗組EZE作用PC-3細胞72h后,PC-3細胞侵襲數(shù)分別為80.62±4.13、62.60±4.08、52.30±3.86、25.
4、61±2.14。實驗組與對照組比較差異均有顯著性(p<0.05);
(4) RT-PCR結(jié)果示:各實驗組EZE作用PC-3細胞72h后, mRNA在凝膠電泳圖上的灰度值比率:①Bax/GAPDH(內(nèi)參)分別為1.557±0.076、1.726±0.068、1.934±0.082、2.113±0.069;②P53/GAPDH分別為2.391±0.083、2.464±0.079、2.613±0.099、2.873±0.092;③B
5、cl-2/GAPDH分別為2.169±0.093、1.973±0.098、1.894±0.102、1.505±0.099。各實驗組之間及實驗組與對照組比較差異均有顯著性(P<0.05)。
(5) Western-blot結(jié)果示:各實驗組EZE作用PC-3細胞72h后,蛋白在膠片圖上的灰度值比率:①Bax/GAPDH分別為1.546±0.052、1.683±0.042、1.809±0.045、1.988±0.053;②P53/G
6、APDH分別為2.234±0.041、2.486±0.031、2.648±0.042、2.889±0.051;③Bcl-2/GAPDH分別為1.249±0.020、1.023±0.043、0.834±0.034、0.613±0.053。各實驗組之間及實驗組與對照組比較差異均有顯著性(P<0.05)。
結(jié)論:①EZE能夠抑制人前列腺癌PC-3細胞體外增殖,并呈時間和濃度依賴性,其機制可能與其誘導細胞凋亡有關;
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