Survivin蛋白在小細胞肺癌和小細胞食管癌中表達的對比研究.pdf

1、研究背景 凋亡異常是當前腫瘤研究的熱點之一。目前已知的凋亡調(diào)節(jié)因子有Bcl-2和IAP(inhibitor ofapoptosis protein，IAP)家族。Survivin是IAP家族中最小的成員，是己知的功能最強的抗凋亡因子，在大多數(shù)惡性腫瘤中高表達而正常組織中不表達，是一種很有前景的腫瘤特異性標志物。 小細胞癌(small cell carcinoma)是一種惡性度及死亡率高的少見惡性腫瘤。小細胞癌大多數(shù)發(fā)生在

2、肺內(nèi)，發(fā)生在肺外的大約只占5﹪，以原發(fā)性食管小細胞癌(primary esophageal small cell carcinoma，PESC)最多見。有人認為，不同組織器官發(fā)生的小細胞癌有共同的臨床病理特點及高度侵襲性的生物學特性。也有人認為，肺外小細胞癌的生物學行為及預后都不同于小細胞肺癌(small cell lung carcinoma，SCLC)。目前關于PESC的組織起源仍有爭議，主要有兩種學說，即起源于與SCLC相同的神經(jīng)

3、內(nèi)分泌細胞(amine precursor uptake anddecarboxylation，APUD)細胞，或與食管鱗腺癌同源的食管黏膜全能干細胞。 由于PESC發(fā)病率很低，人們對其認識有限，目前對此病的治療方案比較混亂，治療策略的探討也有很大的難度，臨床上預后很差。 本研究組在2003年用免疫組化的方法檢測了凋亡抑制蛋白Survivin在PESC中的表達情況，結果發(fā)現(xiàn)：Survivin蛋白在PESC中表達下調(diào)，只有

4、25．6﹪，而細胞凋亡的關鍵蛋白酶Caspase-3的活性相對較高，蛋白陽性表達率為61．5﹪，且兩者的分布有差異性。 相對于非小細胞肺癌(non-small cell lung carcinoma，NSCLC)生物學行為及分子機制越來越深入的研究，SCLC和IPESC癌變機制的研究進展，尤其是PESC的研究進展似乎止步不前。SCLC和PESC的發(fā)生機制目前都還不明確，但現(xiàn)在對腫瘤發(fā)生、發(fā)展有關基因的研究已經(jīng)表明細胞凋亡異常是許

5、多腫瘤發(fā)生的重要機制之一。因此我們選擇從以下兩個層面來探討小細胞肺癌和小細胞食管癌凋亡抑制的發(fā)生機制及其異同。 第一部分： 目的比較PESC和SCLC兩種不同組織器官發(fā)生的小細胞癌在凋亡調(diào)控基因表達上的異同，探討兩者發(fā)病機制的異同，以加深對PESC及SCLC這兩種腫瘤的發(fā)生發(fā)展及生物學特性的了解，尤其是PESC這種罕見腫瘤的了解，有助于尋找和開辟PESCI~床治療的新途徑。方法選取4l例SCLC，采用免疫組化SP法(St

6、reptavidin-peroxidase)檢測凋亡調(diào)控蛋白Survivin、Caspase-3、Bcl-2、MTP53和增殖蛋白Ki-67的表達，結果與本研究組前期在PESC上檢測到的相應指標進行比較。 結果 1.SCLC的Survivin、Caspase-3、Bcl-2、MTP53和Ki-67五種蛋白的表達率與PESC無統(tǒng)計學差異。其中Survivin在SCLC和PESC的表達率分別為29.3﹪和25.6﹪；Bel.

7、2在SCLC和PESC的表達率分別為63.4﹪和48.7﹪；MTP53在SCLC和PESC的表達率分別為56.1﹪和53.8﹪：Caspase.3在SCLC和PESC的表達率分別為51.2﹪3161.5﹪：Ki-67在SCLC和PESC的表達率分別為65.9﹪和46.2﹪。 2.SCLC中Survivinl陰性組CaspaSe-3的表達率(62.1﹪，18/29),顯著高于Survivinl陽性組(25﹪，3/12)，兩者表達呈

8、負相關(r=0.337，P<0.05)；PESC中Survivin陰性組Caspase-3的表達率(72.4﹪，21/29),顯著高于陽性組(30.0﹪，3/10)，兩者表達也呈負相關(r=0.381，P<0.05)。SCLC及PESC中均未發(fā)現(xiàn)Bd-2與Caspase-3的表達有相關性(P均>0.05)。 3.SCLCqb，Bel一2陽性組中MTP53的表達率(69.2﹪，18/26)顯著高于陰性組的表達率(33.3﹪，5/1

9、5)，兩者表達呈正相關(r=0.348，P<0.05)；PESC中，Bcl-2陽性組q~MTP53的表達率(73.7﹪，14/19)高于陰性組的表達率(35.0﹪，7/20)，兩者表達也呈正相關(r=0.388，P<0.05)。SCLC及PESC中均未發(fā)現(xiàn)Survivin與MTP53的表達有相關性(P均>0.05)。 4.SCLC和PESC中，Survivin與Bcl．2表達之間均無相關性(P均>0.05)。 結論 SCLC和H

10、PESC的抗凋亡通路中存在諸多的相同之處：凋亡抑制蛋白Survivin、Bcl-2、MTP53均參與了兩種小細胞癌的發(fā)生發(fā)展；Survivin、Bcl-2、MTP53三個蛋白在兩種腫瘤中發(fā)揮的作用相似。 第二部分： 目的比較SCLC與NSCLC組織器官發(fā)生相同、病理類型不同的兩種腫瘤的凋亡調(diào)控基因表達的異同，有助于加深對SCLC這種罕見腫瘤的發(fā)生發(fā)展及生物學特性的了解，有助于間接地加深對PESC發(fā)病機制的認識。

11、方法選取30例NSCLC及20例癌旁正常組織，采用免疫組化SP法檢測以上五個凋亡相關蛋白的表達，與SCLC對應指標進行對比，并探討它們與肺癌生物學特征間的關系及這些因素間的相關性。 結果 1.SCLC的發(fā)病年齡<60歲占63.4﹪，高于NSCLC的36.7﹪(P<0.05)。SCLC Ⅲ-Ⅳ期的比例明顯高于NSCLC(P<0.05)。SCLC與NSCLC在性別、淋巴結轉移與否方面無顯著差異。 2.SCLC和NSC

12、LC腫瘤組織中Survivin、Bcl-2的陽性表達率均顯著高于正常對照組(P值~均<0.01)；SCLC中Survivin陽性表達率(29.3﹪)顯著低于NSCLC(70﹪)，有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。SCLC中Bcl-2陽性表達率(63.4﹪)顯著高于NSCLC(30﹪)，有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。而Caspase-3蛋白在SCLC與NSCLC中表達率無顯著性差異(P>0.05)． 3．SCLC和NSCLCH腫瘤組織

13、中KI顯著高于正常組織(P值均<0.01)。SCLC的KI(11.12±0.37﹪)顯著高于NSCLC(4.55±0.28﹪)，兩者有顯著性差異(P<0.01)。 4.SCLC中，Survivin與Caspase-3的表達呈負相關(r=-0.337，P<0.05)；NSCLC中，Survivin陽性組HCaspase-3的表達率(88.9﹪，8/9)顯著高于陽性組(19.0﹪，4/21)，Survivin與Caspase-3的表

14、達呈顯著負相關(r=-0.653，P<0.01)。SCLC中，Bcl-2與MTP53的表達呈正相關(r=0-348，P<0.05)；NSCLC中，Bcl-2陽性組中MTP53的表達率高于陰性組的表達率，但統(tǒng)計學無意義。SCLC和NSCLC中，Survivin與Bcl-2之間均無顯著相關性(P均>0.05)。 5．SCLC中，Caspase-3陽性組KI(18．16±0．29﹪)高于陰性組(6．62+0．40﹪)，有統(tǒng)計學意義(P

15、<0.05)；NSCLC增殖指數(shù)KI與各個凋亡相關基因的表達、年齡、淋巴結是否轉移及臨床分期均無顯著相關性P＜0.05)． 6．SCLC中，淋巴結轉移組Survivin陽性率(53．3﹪)顯著高于無淋巴結轉移組(15．4﹪)，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。 結論 SCLC和NSCLC既存在相同之處也存在差異：凋亡抑制蛋白Survivin、Bcl-2、MTP53均參與了兩種腫瘤的發(fā)生發(fā)展。其中Bcl-2可能是SCLC凋