人臍帶血間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療骨性關(guān)節(jié)炎的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：
　　利用間充質(zhì)干細(xì)胞多向分化的潛能，通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)分析大鼠骨性關(guān)節(jié)炎用人臍帶血間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療的可行性及安全性，并探討其關(guān)節(jié)腔注射治療的價(jià)值，為臨床上此類疾病的治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：
　　將無特定病原體SPF級(jí)雌性Wistar大鼠60只，體重100～150g，隨機(jī)分為4組：正常對(duì)照組、假手術(shù)組、模型對(duì)照組、干細(xì)胞組。采用改良Hulth法建立模型對(duì)照組、干細(xì)胞組，正常對(duì)照組不做任何處理，假手術(shù)組僅切開關(guān)

2、節(jié)囊，即逐層縫合傷口。術(shù)后傷肢不做固定，分籠飼養(yǎng)，自由活動(dòng)。術(shù)后每天每只大鼠肌肉注射青霉素2萬U預(yù)防感染，注射3天。膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎的模型6周后可獲得。于術(shù)后第6周末開始，向干細(xì)胞組膝關(guān)節(jié)內(nèi)注射1.0×105人臍帶血間充質(zhì)干細(xì)胞，每周注射1次，連續(xù)注射4周；與干細(xì)胞組不同，模型對(duì)照組及假手術(shù)組注射等量生理鹽水，每周注射1次，連續(xù)注射4周；正常對(duì)照組不做任何治療。于最后一次注射2周后，麻醉下將全部大鼠行頸椎離斷處死，處死后立即解剖觀察膝關(guān)

3、節(jié)。取完整股骨內(nèi)側(cè)髁，常規(guī)脫鈣后，行石蠟包埋，5μm厚切片，每組取15張切片，常規(guī)脫蠟，行蘇木精-伊紅染色，于光學(xué)顯微鏡下進(jìn)行觀察，進(jìn)行Mankin評(píng)分。每組另取15張切片，用免疫組化的方法檢測(cè)各組軟骨中基質(zhì)金屬蛋白酶-1的表達(dá)強(qiáng)度。
　　結(jié)果:
　?。?）大體觀察結(jié)果：干細(xì)胞組關(guān)節(jié)軟骨退變程度輕于模型對(duì)照組，正常對(duì)照組及假手術(shù)組關(guān)節(jié)軟骨退變程度輕于干細(xì)胞組。
　?。?）HE染色組織學(xué)觀察結(jié)果：干細(xì)胞組Mankin評(píng)分