用佐劑性關節(jié)炎大鼠探討中藥治療PA的復方配伍規(guī)律.pdf

1、目的：
　　 用臨床治療類風濕性關節(jié)炎使用頻率高的解表藥(麻黃、桂枝)祛風濕藥(川烏、草烏)活血藥(當歸、川芎)及其復方制成煎劑，對佐劑性關節(jié)炎的大鼠灌胃治療，通過觀察足爪腫脹、病理改變、炎性因子等指標的改變，探討不同配伍的中藥的作用效果、配伍規(guī)律、藥物作用機制以及在復方中發(fā)揮主要作用的藥物等。
　　 方法：
　　 1.健康雄性Wistar大鼠24只，隨機分為模型組和對照組，每組12只，模型組每只左后足趾部皮內注

2、射卡介苗濃度10mg/ml的完全弗氏佐劑0.1ml，對照組相同部位注射等量的生理鹽水，制炎后每隔日測定雙側足爪腫脹程度，第22天，處死大鼠，取右側踝關節(jié)制作切片，觀察滑膜組織，以確定造模是否成功。
　　 2.雄性Wistar大鼠84只，隨機分為對照組、模型組、地塞米松組、復方組、祛風濕組、活血組、解表組，每組12只。除對照組之外，其余各組均制作佐劑性關節(jié)炎大鼠模型。各組給予不同的藥物合劑，藥物用量根據(jù)動物給藥劑量公式和大鼠體表面

3、積計算所得，每組灌胃22天。模型制各開始后每隔天測量雙側足爪腫脹度，以觀察治療后的療效；第22天，心臟采血，測量血清NO、MDA水平與SOD活性；每組隨機選擇3只取右側踝關節(jié)做切片，以觀察滑膜組織病理改變。其余9只用ELISA法檢測足爪浸液中TNF-α、IL-1β、PGE2水平。剝離每只大鼠的胸腺和脾臟，分別稱重，計算胸腺指數(shù)或脾臟指數(shù)。
　　 結果：
　　 1.模型組大鼠左側足爪在注射佐劑次日即明顯腫脹，第3天達高峰，

4、以后逐漸減輕。第11天右側足爪開始腫脹，第15天達高峰，關節(jié)活動功能障礙，此后腫脹逐漸減輕直至觀察結束。模型組除個別大鼠外，均可見耳部、鼻尖、尾部炎性小結。右側踝關節(jié)病理切片顯示：滑膜細胞增生，炎癥細胞浸潤，血管翳形成。說明佐劑性關節(jié)炎造模成功。
　　 2.與模型組比較，復方組、地塞米松組、祛風濕組、解表合劑、活血合劑對左右雙側足爪腫脹度均有明顯地抑制作用，其中復方組、地塞米松組、祛風濕組作用最強。組間比較顯示：左側足爪從治療后

5、第7天開始，右側足爪從治療后的第13天開始，復方組、地塞米松組、祛風濕組的治療效果基本相同。與復方組比較，活血組對足爪腫脹抑制程度弱于復方組，解表組的抑制作用最弱，且與復方組有顯著統(tǒng)計學差異。
　　 3.復方組、地塞米松組、祛風濕組足爪浸液TNF-α、IL-1β、PGE2水平明顯低于模型組，解表組足爪PGE2水平低于模型組，活血組足爪浸液TNF-α、IL-1β、PGE2的水平與模型組無統(tǒng)計學差異。解表組、活血組足爪浸液TNF-α

6、、IL-1β、PGE2水平要明顯高于復方組。
　　 4.復方組、地塞米松組、祛風濕組、活血組血清MDA、NO水平明顯低于模型組，SOD活性高于模型組，而解表組與模型組無統(tǒng)計學差異。
　　 5.造模組脾臟指數(shù)與胸腺指數(shù)明顯高于正常，而地塞米松組明顯低于正常；各中藥治療組的脾臟指數(shù)與胸腺指數(shù)均有所升高，與模型組沒有統(tǒng)計學差異。
　　 6.各組大鼠踝關節(jié)病理切片顯示：復方組和祛風濕組少見炎性細胞浸潤、滲出及血管翳形成，

7、解表組和活血組有滑膜細胞增厚，輕中度炎癥細胞浸潤，偶見血管翳形成。
　　 結論：
　　 1.本次實驗造模的AA大鼠在臨床表現(xiàn)、病理、免疫與人RA有著相似的特點，是研究RA的較理想模型。
　　 2.復方合劑、祛風濕合劑、活血合劑、解表合劑均能抑制AA大鼠足爪的腫脹，改善踝關節(jié)病理變化，其中，復方合劑有明顯的治療效果，祛風濕合劑在治療效果與復方合劑無差異，說明：祛風濕合劑在復方合劑中可能發(fā)揮主要的治療作用。